突触蛋白在肌萎缩侧索硬化转基因小鼠运动神经元上的表达

摘要

目的:评估肌萎缩侧索硬化转基因小鼠脊髓前角和大脑运动皮质运动神经元上的突触蛋白在不同疾病阶段的数量变化。方法:实验于2003-11/2004-06在墨尔本大学HFI研究所脑损伤与修复组完成。表达突变人类超氧化物歧化酶1基因的转基因小鼠36只(肌萎缩侧索硬化组),以及表达B6SJL基因的正常小鼠36只(对照组),两组分别按性别及出生后60,90及120d随机分为每个时间点12只,雌雄各半。①采用荧光金标记法标记腰段脊髓及皮层的运动神经元。②采用免疫荧光方法标记突触蛋白,阳性对照为加入突触蛋白抗体并有阳性表达;阴性对照省略此抗体。③采用共焦计数系统计数并行统计学分析。结果:①荧光金标记的运动神经元:经荧光显微镜检查确定腰段脊髓及皮层的运动神经元均被荧光金清楚地标记。②运动神经元的突触蛋白计数:在疾病中期出生后90d及后期出生后120d,运动神经元上的突触蛋白的数量呈显著性降低(腰段脊髓细胞体:(0.75±0.06),(0.59±0.09)/μm;腰段脊髓树突:(0.71±0.06)(0.55±0.03)/μm;大脑皮层运动神经元细胞体:(0.79±0.03),(0.63±0.08)/μm;大脑皮层运动神经元树突:(0.76±0.07),(0.61±0.08)/μm,P<0.01);同组别雌雄对照差异无显著性。结论:肌萎缩侧索硬化运动神经元突触蛋白数量的降低与疾病及病程的进展有直接关系。