人胰岛细胞制备过程中细菌性污染的监测与干预

摘要

目的:在胰岛细胞制备过程中监测并预防性使用敏感抗生素,防止、清除制备过程中出现的污染,保证用于移植的胰岛细胞质量,以期减少移植后感染的发生,确保移植进一步用于临床的效果。方法:体外分离人胰岛细胞实验是于2004-11/2005-10在广州中山大学附属第三医院中心实验室进行。①成人胰岛细胞的分离纯化及其过程中细菌性污染的监测:胰腺取自成人脑死亡尸体,生前无糖尿病及相关病史(家属知情同意),胰腺进行修剪、灌注后,胰岛细胞消化收集中;COBE-2991细胞纯化机纯化胰岛细胞后;体外培养48h后6个步骤取样进行细菌性污染的鉴定,并作药敏实验。②在同样的制备过程中,分别采用青霉素+链霉素+两性霉素B或泰能+两性霉素B进行干预,未施加干预措施作为对照组。③胰岛细胞的功能测定:采用体外胰岛素释放试验,测定纯化培养后未被污染的胰岛细胞功能。结果:①3组不同处理的胰岛细胞(纯化培养后)的污染率:未用抗生素的对照组为100%、青霉素+链霉素+两性霉素B组为50%,泰能+两性霉素B组为0,3组污染率差异有显著性(P<0.05)。②取培养后未污染的胰岛细胞行体外胰岛素释放试验结果:青霉素+链霉素+两性霉素B组、泰能+两性霉素B组两组胰岛细胞高糖时胰岛素释放量分别是低糖的2.41和2.36倍(t=4.76,P<0.05),提示青霉素+链霉素+两性霉素B组、泰能+两性霉素B组胰岛细胞分泌功能良好。两组间的胰岛素敏感指数(ISI)在统计学上差异也无显著性(t=0.31,P=0.76),说明两组抗生素对胰岛细胞功能的影响无差异。结论:胰岛细胞制备过程中细菌性污染严重。泰能+两性霉素B的联合应用能有效清除胰岛细胞制备过程中出现的细菌性污染,经泰能+两性霉素B处理的胰岛细胞行胰岛素释放试验表明分泌功能良好。