阿霉素致兔心脏毒性心肌细胞凋亡及相关基因bcl-2,bax蛋白表达变化

摘要

目的:观察不同剂量阿霉素心脏毒性心肌细胞凋亡情况及相关基因bcl-2,bax蛋白表达变化.方法:实验于2005-06/2006-08在大连医科大学附属第二医院实验中心完成.选用健康新西兰纯种白兔42只,按随机数字表法分成4组:①对照组(n=10),给予2 mL/kg的生理盐水静脉注射,1次,周,共8周.②阿霉素4 mg/kg组(n=10),给予阿霉素2mg/kg,以生理盐水稀释耳缘静脉注射,1次,周,共2周.③阿霉素8mg/kg组(n=10),同样方法给予阿霉素,共4周.④阿霉素16 mg,kg组(n=12),同样方法给予阿霉素,共8周.12周后麻醉处死兔,取心肌组织,应用原位末端标记法标记凋亡的心肌细胞;应用免疫组织化学法检测bcl-2,bax蛋白的表达,以平均吸光度表达.结果:阿霉素16 mg/kg组兔死亡3只,最后39只兔进入结果分析.①透射电镜观察结果:对照组、阿霉素4 mg/kg组未见心肌细胞凋亡;阿霉素8 mg/kg组和阿霉素16 mg/kg组均观察到细胞核变小、核染色质浓缩、边聚的凋亡心肌细胞.②心肌细胞凋亡指数:对照组、阿霉素4 mg/kg组未见心肌细胞凋亡;阿霉素8 mg/kg组和阿霉素16 mg/kg组心肌细胞凋亡指数显著高于对照组(P＜0.01).③心肌bcl-2与bax蛋白表达:阿霉素8/16 mg/kg组bcl-2蛋白表达显著低于对照组(P＜0.01),bax蛋白表达显著高于对照组(P＜0.01),bcl-2/bax显著低于对照组(P＜0.01).阿霉素16 mg/kg组bcl-2蛋白表达显著低于阿霉素8 mg/kg组(P＜0.01),bax蛋白表达显著高于阿霉素8 mg/kg组(P＜0.01).与对照组相比,阿霉素4 mg/kg组bcl-2,bax蛋白表达及bcl-2,bax无明显变化(P＞0.05).结论:阿霉素4 mg/kg组可能因阿霉素剂量小未出现心肌细胞凋亡,阿霉素8,16 mg/kg组可见典型凋亡心肌细胞,并且呈一定的量效关系,进一步说明细胞凋亡机制参与了阿霉素心脏毒性的病理过程,其作用与下调bcl-2基因的蛋白表达、上调bax基因的蛋白表达有关.