壳寡糖及其配合物对胰岛细胞增殖、胰岛素分泌的促进作用

摘要

背景:壳寡糖与有益于糖尿病治疗的微量元素形成配合物兼备了壳寡糖及微量元素的各种特性,很有可能在糖尿病及其并发症预防与治疗的研究方面取得新的进展。目的:观察壳寡糖及其铬、钒、硒配合物对胰岛β细胞系NIT-1的促增殖及促胰岛素分泌作用。设计、时间及地点:对比观察实验,于2008-07/09在中国海洋大学生物化学实验室完成。材料:壳寡糖及其铬、钒、硒配合物由中国海洋大学生物化学实验室制备;转基因小鼠胰岛β细胞系NIT-1细胞株由中国海洋大学药物所提供。方法:①胰岛β细胞系NIT-1细胞株接种于96孔板中,实验组加入100mg/L壳寡糖及其配合物的培养液培养,并设加入不含样品的培养液作为对照组,分别在加样后24,48,72,120,168,216h取出,MTT法测定细胞生长曲线。②胰岛β细胞系NIT-1细胞株接种于24孔培养板中,实验组加入100mg/L壳寡糖及其配合物的培养液,并设加入不含样品的培养液作为对照组,分别在加样后2,4,6,8,10,12,14d取出,用放射免疫法测定培养液中的胰岛素含量。同时在培养6d后进行胰岛素刺激释放试验,测定胰岛素释放量,计算刺激指数。主要观察指标:壳寡糖及其配合物对胰岛细胞促增殖作用及促胰岛素分泌作用。结果:壳寡糖及铬、硒配合物最适质量浓度为100mg/L,对胰岛β细胞有明显的增殖作用。壳寡糖铬、硒配合物在48h促胰岛β细胞增殖明显,且在120h细胞进入生长平台期,壳寡糖铬配合物组细胞密度达到最大,活力高于其他组。壳寡糖及其铬、钒、硒配合物组在第10天胰岛素释放量均高于对照组(P<0.05),壳寡糖组促胰岛素分泌作用最为显著。培养第6天壳寡糖及其铬、钒、硒配合物组胰岛素刺激指数均高于对照组(P<0.05)。结论:壳寡糖及其配合物对于胰岛β细胞体外增殖具有明显的促进作用,并可以显著促进胰岛β细胞的胰岛素分泌。