Hoechst33342对大鼠骨髓间充质干细胞的标记☆

摘要

10.3969/j.issn.2095-4344.2012.49.005%　　背景：hoechst33342可以用于对骨髓间充质干细胞的标记,但是其标记的最佳浓度的研究目前尚未见报道.目的：观察不同浓度的Hoechst33342对大骨髓间充质干细胞的增殖、标记率的影响,以及其荧光持续时间.方法：贴壁筛选提取大鼠骨髓间充质干细胞,培养至第3代,流式细胞仪检测其表面抗原,成骨、成脂诱导后染色,用不同浓度Hoechst33342标记大鼠骨髓间充质干细胞后,检测标记后的大鼠骨髓间充质干细胞增殖率、标记率,荧光显微镜下观察其持续时间.结果与结论：① hoechst33342可以用于骨髓间充质干细胞的标记,其最佳标记浓度为5 mg/L,标记持续时间较长,30 d未见猝灭.②其荧光激发后对细胞有损伤作用,标记浓度超过10 mg/L时,可致细胞死亡.③标记浓度在7.5 mg/L时,细胞增殖受到抑制；标记浓度在2.5 mg/L 时,标记时间较短,7 d 时荧光减弱,14 d 荧光消失.结果表明, hoechst33342可用于骨髓间充质干细胞的标记,其对骨髓间充质干细胞标记的最佳浓度为5 mg/L；细胞表型鉴定CD45阴性,CD44,CD90均呈阳性表达.