红景天苷与淤胆血清诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化

摘要

背景：大量实验证实骨髓间充质干细胞在诱导因子及特定微环境下可诱导分化为肝细胞，并已广泛用于终末肝病的临床替代治疗，而其最佳诱导条件目前尚不清楚。 目的：初步探讨中草药红景天苷联合淤胆大鼠血清体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的可行性和有效性。 方法：采用全骨髓贴壁培养法从大鼠骨髓中获取骨髓间充质干细胞，流式法检测干细胞表型；胆总管结扎切断法制备大鼠淤胆血清。取第3代骨髓间充质干细胞分3组体外诱导培养：空白对照组，基础培养基＋5%淤胆血清；红景天苷组：基础培养基＋5%淤胆血清＋30μmol/L红景天苷；阳性对照组：基础培养基＋5%淤胆血清＋20μg/L肝细胞生长因子；观察各组诱导培养过程中细胞形态变化，RT-PCR法、Western-Blot法检测各诱导组肝细胞特异性蛋白表达水平。 结果与结论：骨髓间充质干细胞高表达 CD90、CD105，不表达 CD45、CD14、CD34、CD79a；空白对照组、红景天苷组、阳性对照组细胞在诱导培养中均出现多角及双核细胞；空白对照组、红景天苷组、阳性对照组在诱导培养7 d开始出现甲胎蛋白、白蛋白的mRNA及蛋白表达；在同一时间点空白对照组表达率最低（P〈0.05），红景天苷组、阳性对照组间比较，差异无显著性意义（P〉0.05）。与传统淤胆血清体外诱导相比，红景天苷联合淤胆血清能更有效诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化。