高密度接种对转化生长因子β1诱导上皮间充质转化的影响

摘要

背景：细胞密度是影响细胞分化状态的因素之一，对于细胞密度在转化生长因子β1诱导HaCaT细胞上皮间充质转化中的作用尚缺乏深入研究。目的：观察细胞密度对转化生长因子61诱导HaCaT细胞上皮间充质转化的影响。方法：将HaCaT细胞分别以低密度103／cm2和高密度105／cm2接种于六孔板，使用2ug／L的转化生长因子β1作用48h，观察细胞形态变化，应用Realtime PCR检测上皮型钙黏蛋白、紧密连接蛋白1和波形蛋白、神经型钙黏蛋白的转录水平，Western blot检测上皮型钙黏蛋白和波形蛋白表达水平。结果与结论：低密度组的HaCaT细胞在转化生长因子B1处理48h后细胞间隙变大，细胞形态由多角形变为长梭形，高密度组的细胞间隙变大，但形态变化不明显：Realtime PCR结果显示两组上皮细胞标志物上皮型钙黏蛋白和紧密连接蛋白1的转录均较对照组明显下调（P＜0．05），但高密度组没有低密度组下调明显（P〈0．05），间充质细胞标志物神经型钙黏蛋白和波形蛋白的转录均较对照组明显上调（P〈0．05），而高密度组与低密度组间差异无显著性意义；Wesfern blot进一步验证了上述上皮型钙黏蛋白和波形蛋白的变化。说明高接种密度抑制转化生长因子β1诱导HaCaT细胞上皮间充质转化。