MRI活体示踪心肌梗死大鼠骨髓间充质干细胞的移植

摘要

背景：干细胞移植的疗效和安全性评估均需要对体内干细胞的存活、分布、迁徙、增殖及分化进行连续监测。目的：观察MRI示踪超顺磁性氧化铁标记的骨髓间充质干细胞在缺血心肌组织的分布、迁徙情况。方法：直接贴壁法分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞，获得的细胞进行免疫鉴定。以新型超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞，体外MRI成像确定其体内示踪的可行性。标记后锥虫蓝拒染试验、MTT比色试验分别检测标记细胞的活力、增殖情况。60只SD大鼠随机分为3组，制备大鼠心肌梗死模型2周后再次开胸移植含标记骨髓间充质干细胞的PBS混合液、含未标记骨髓间充质干细胞的PBS混合液和等量PBS。于移植后第1天、第3周行MRI检查，动态观察移植细胞的分布、迁徙，并根据MRI图像定位选择性行CD90免疫组化检查。结果与结论：骨髓间充质于细胞标记后，普鲁士蓝染色见胞浆内蓝色铁颗粒，标记效率为99％，标记细胞与未标记细胞间锥虫蓝拒染率、MTT吸光度差异无显著性意义。体外MRI可检测到标记细胞，并在T2WI及T2W／FFE序列上呈低信号。细胞移植1d后，在T2WI及T2W／FFE序列上可见标记细胞在梗死心肌边缘呈类圆形低信号；移植3周后，移植区域信号边界模糊，范围扩大，对比度降低。CD90免疫组化检测证实移植细胞可由梗死边缘向梗死区域迁徙。结果可见新型超顺磁性氧化铁可成功对大鼠骨髓间充质干细胞进行标记，细胞标记后可被MRI检测。