改良细胞灌流分离装置提高心肌细胞分离效率

摘要

背景：成熟心肌细胞分离过程复杂,获得数量稳定、高质量的心肌细胞迄今仍无统一、高效、活性好、简便的方法可循。目的：通过改良Langendorff细胞灌流分离装置,探讨一种更高效的成熟心肌细胞分离方法。方法：采用细胞灌流分离装置,用Ⅱ型胶原酶经主动脉逆行灌流法分离成年SD大鼠心肌细胞。对照组采用传统Langendorff细胞灌流分离装置;实验组采用改良Langendorff细胞灌流分离装置。消化结束即刻在显微镜下观察细胞形态、杆状细胞比率并计算活细胞产量;通过锥虫蓝染色评价心肌细胞活性。结果与结论：实验组活细胞产量为（3.7±0.5）×107,显著高于对照组（2.1±0.4）×107,差异有显著性意义（P〈0.05）。实验组锥虫蓝染色阴性的杆状细胞比率（85.6±5.5）%,显著高于对照组（71.8±5.7）%,差异有显著性意义（P〈0.05）。提示采用改良Langendorff离体心脏灌流系统可获得高产量、高活性的心肌细胞,提高了成熟心肌细胞的分离效率,为成熟心肌细胞培养及研究奠定了基础。