人牙髓细胞分化过程中DNA甲基胞嘧啶双加氧酶TET家族的表达

摘要

背景：DNA甲基胞嘧啶双加氧酶TET家族可将甲基胞嘧啶氧化为羟甲基胞嘧啶，参与机体DNA去甲基化，调控细胞增殖与分化，但其在牙髓细胞中的表达模式仍不清楚。目的：检测TET家族在牙髓细胞成牙本质分化过程中的表达模式。方法：采用酶消化法分离培养人牙髓细胞，细胞免疫荧光法检测TET家族的表达及分布；Western Blot检测TET家族在牙髓细胞传代培养（P1-P7代）中的表达规律；对第3代牙髓细胞矿化诱导7，14 d，qRT-PCR法检测矿化诱导第0，7，14 d的TET家族mRNA水平，Western Blot法检测其蛋白量的表达变化。结果与结论：TET家族在人牙髓细胞的细胞质和细胞核中均有表达。在牙髓细胞体外传代培养过程中，TET1蛋白在P1-P6代随细胞传代呈上升趋势，TET2蛋白在P2和P3代细胞中表达增强（P〈0.05），TET3表达量在不同细胞代数之间差异无显著性意义（P 〉0.05）。细胞经矿化诱导后，TET1，TET2和TET3的mRNA和蛋白表达量均升高（P〈0.05）。以上结果提示TET家族可能参与调控牙髓细胞成牙本质分化进程。