球形多孔微载体支持下高密度培养人肝细胞L-02的定时形态变化

摘要

背景：微载体培养技术作为一项体外高浓度细胞培养技术，近年来已在肝细胞的体外培养中得到应用。目的：对壳聚糖球形多孔微载体培养的人肝细胞L-02进行定时的形态学观察。方法：以自制的壳聚糖球形多孔微载体样本为支架来培养人肝细胞 L-02设为实验组；无壳聚糖球形多孔微载体支持下人肝细胞的培养设为对照组。对两组细胞进行定时的细胞计数，对实验组进行形态学观察，包括倒置相差生物显微镜观察和扫描电子显微镜观察。结果与结论：两组培养的细胞数量均呈现前3 d增长，在培养第3天细胞数量达到最高值；实验组3个样本培养的细胞数明显高于对照组无微载体培养的细胞数量（P0.05）。倒置相差生物显微镜下动态观察，可见前3 d微载体表面黏附生长的肝细胞则逐渐增多，培养第3天可见大部分微载体表面有许多肝细胞黏附成团，总的存活率均在90%以上，且肝细胞保持着良好的形态学结构；扫描电子显微镜观察，微载体表面、切面和内部均可看到有许多球状肝细胞紧密黏附。结果说明，以自制的壳聚糖球形多孔微载体作为一种支架，在体外三维环境下可以进行高浓度细胞培养。