构建靶向性载脂蛋白E修饰脂质体介导的HSVtk/丙氧鸟苷系统

摘要

背景：自杀基因系统无选择性，不仅能杀伤癌细胞，对正常细胞也有同样作用，所以构建靶向性基因治疗载体成为迫切需要解决的问题。 目的：评价载脂蛋白E修饰脂质体（apoE-lipoplexes）介导TK/丙氧鸟苷自杀基因质粒转染对Li-7肝癌细胞的杀伤效果。 方法：apoE-lipoplexes包裹pAFP-TK-IRES2-EGFP真核表达质粒转染Li-7细胞，筛选HSVtk稳定表达细胞克隆（Li-7-tk），荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白表达，Western blotting检测HSVtk基因表达，MTT法评价HSVtk/丙氧鸟苷系统对Li-7肝癌细胞的杀伤作用。 结果与结论：自杀基因质粒转染Li-7细胞经筛选得到稳定克隆（Li-7-tk），HSVtk/丙氧鸟苷系统作用于 Li-7细胞后，细胞凋亡明显增加（P〈0.01）。在甲胎蛋白阳性的Li-7肝癌细胞中，自杀基因载体稳定表达并有效杀灭癌细胞。