促红细胞生成素基因修饰内皮祖细胞移植治疗下肢动脉闭塞：磁标记MR成像评价

摘要

背景：促红细胞生成素及内皮祖细胞移植均对下肢动脉闭塞有一定的治疗作用。目的：探讨超顺磁氧化铁纳米颗粒（super paramagnetic iron oxide,SPIO）标记的内皮祖细胞体外促红细胞生成素基因修饰效果及体外磁共振成像的可行性。方法：将对数生长期的大鼠骨髓来源内皮祖细胞分4组培养,内皮祖细胞组,SPIO标记转染组将pcD NA3-EPO重组质粒并转染至内皮祖细胞,随后进行SPIO标记;SPIO标记空载病毒组将空质粒转染至内皮祖细胞,随后进行SPIO标记;SPIO标记内皮祖细胞组直接进行SPIO标记。采用4.7 T MR成像SPIO标记的内皮祖细胞;检测4组细胞增殖、细胞周期分布及促红细胞生成素蛋白表达。结果与结论：（1）MR成像：T1WI、T2WI、T2＊WI序列均见细胞信号降低,随着细胞数目增多,信号降低逐渐明显;相同数量级细胞,T1WI信号降低最弱,T2＊WI信号降低最明显;T1WI、T2WI、T2＊WI所能检测到的最小细胞数分别为2×104、1×104、0.5×104;（2）细胞增殖、细胞周期分布：3组标记内皮祖细胞增殖、细胞周期分布与内皮祖细胞组比较差异均无显著性意义;（3）促红细胞生成素蛋白表达：仅SPIO标记转染组可见促红细胞生成素蛋白表达;（4）结果表明：SPIO标记的内皮祖细胞体外促红细胞生成素基因修饰后对细胞增殖、细胞周期无影响,4.7 T MR能够在体外对SPIO标记的促红细胞生成素基因修饰内皮祖细胞成像。