细胞角蛋白20对膀胱癌早期诊断的前瞻性研究

摘要

@@新近研究发现，细胞角蛋白20（cytokeratin 20，CK20）是一种极有可能成为诊断膀胱癌及其随访的特异性生物标记物［1，2］。为此，我们对CK20在膀胱癌的早期诊断中的应用进行了初步探讨。rn 1．资料与方法：62例肉眼血尿患者，其中膀胱肿瘤术后随访发现血尿42例作前瞻性分析。所有患者进行膀胱镜检查及尿脱落细胞学和CK20检测。分析参数包括肿瘤数目、大小及WHO分级，术前或活检前留取尿液行脱落细胞学和CK20标志物免疫荧光检测。rn 收集晨起第1次新鲜尿100 ml。尿脱落细胞学检查按常规方式进行。将收集的尿液用Hanks液洗涤2次，1?500 r/min，5 min，收集沉淀细胞，以完全RPMI 1640培养基将沉淀细胞制成细胞悬液(2×105/ml)，37 ℃温箱中贴壁孵育6 h。原位冷丙酮固定10～15 min，用PBS洗涤3×3 min后，滴加抗CK20单抗，置湿盒内4 ℃过夜；PBS洗涤3×3 min后滴加荧光标记抗体羊抗鼠IgG-FITC 1∶10，37 ℃,40 min；PBS洗涤3×3 min后，荧光显微镜下观察并摄片。细胞浆和细胞膜发黄绿色的荧光为阳性反应。