白芷活性提取物对成纤维细胞生物学特性的影响

摘要

目的体外观察白芷活性提取物对人皮肤成纤维细胞（Fb）生物学特性的影响,探讨其促进创面愈合的可能机制。方法分离培养人正常Fb,按照随机数字表法分白芷活性提取物不同浓度组,以体积分数0.25%,的新生牛血清DMEM为对照组。采用噻唑蓝比色法（MTTr）检测不同浓度白芷活性提取物对体外培养的Fb增殖作用的影响。通过流式细胞仪、real-timePCR分别检测白芷活性提取物最适浓度培养条件下Fb的细胞周期变化以及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达情况。结果白芷活性提取物在5×10-4～5×10-2g/L浓度范围内可显著促进Fb增殖,呈剂量依赖性,不同浓度白芷活性提物培养液组测得吸光度（A）值分别为0.346±0.055、0.387±0.043和0.310±0.026,与对照组（0.273±0.042）比较,差异有统计学意义（t=3.36、5.79和2.49,P＜0.05）,其中在5×10。g/L浓度时测得A值最高,促增殖作用最为显著,为白芷活性提取物促进Fb增殖的最适合浓度。此浓度条件下白芷活性提取物可明显促进Fb通过G1/S及S/G2期限制点,S期（26.6±2.6）及G2/M期（7.4±1.3）细胞与对照组相比明显增多,G0/G1期细胞（66.3±4.5）与对照组相比明显减少（t=11.2、5.69、2.44,P＜0.05）。5×10-3g/L白芷活性提取物组与对照组比较Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达明显上调（分别为1.6l±0.26比1.00±0.16和3.36±0.40比1.00±0.14）,差异有统计学意义（t=6.69、7.64,P＜0.01）。结论白芷活性提取物能显著促进Fb增殖,加快Fb细胞周期进程,同时可上调I、Ⅲ型胶原mRNA的表达,可能与白芷促进创面愈合的机制有关。