痘苗病毒致炎兔皮提取物促进小胶质细胞M1向M2极化、抑制炎性因子分泌的体外研究

摘要

目的 探讨痘苗病毒致炎兔皮提取物(AGC)对缺血性脑卒中细胞模型脑内炎症反应的影响及作用机制.方法 采用连二亚硫酸钠(Na2S2O2)无糖培养基在体外模拟缺血性脑卒中模型.将BV2细胞分为6组:对照组、对照加0.5 U/ml AGC组、氧糖剥夺再恢复(OGD/R)组,OGD/R加AGC(0.25 U/ml、0.5 U/ml、1.0 U/ml)组.OGD/R加AGC组氧糖剥夺1.5 h后换为正常培养基,同时给予不同浓度AGC,共同孵育3 h后进行细胞处理.取细胞上清液分别测定白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量.免疫荧光染色观察CD16++CD32+(M1型小胶质细胞)和CD206+(M2型小胶质细胞)细胞数.将BV2细胞分为7组:对照组、对照加0.5 U/ml AGC组、IL-4组、IL-4+脂多糖(LPS)+干扰素-γ(IFN-γ)组、IL-4+LPS+IFN-γ加AGC(0.25 U/m、0.5 U/m、1.0 U/ml)组.IL-4+LPS+IFN-γ加AGC组IL-4处理24 h后,向细胞中加入LPS+IFN-γ处理18 h,加入相应浓度AGC 24 h后,流式细胞仪观察CD16+CD32和CD206的表达.结果 与对照组相比,OGD/R组细胞上清液中IL-6、TNF-α含量明显增加(P<0.01),CD16++CD32+细胞数增多,CD206+细胞数减少;与OGD/R组相比,AGC各剂量组IL-6、TNF-α含量均明显降低(P<0.01),CD16++CD32+细胞数减少,CD206+细胞数增多.与对照组比较,IL-4组CD206有增多趋势,CD16+CD32有减少趋势;与IL-4组比较,IL-4+LPS+IFN-γ组CD16+CD32有增多趋势,CD206有减少趋势;与IL-4+LPS+IFN-γ组比较,AGC各剂量组CD16+CD32有减少趋势,0.25 U/ml、0.5 U/ml AGC剂量组CD206有增多趋势,1.0 U/ml AGC剂量组CD206表达增多(P<0.05).结论 AGC可通过促进小胶质细胞从M1表型向M2表型极化,抑制炎症因子的分泌.