香烟烟雾提取物致体外皮肤成纤维细胞损伤和对胶原合成的影响

摘要

目的 探讨香烟烟雾提取物(CSE)对体外培养的皮肤成纤维细胞的损伤作用,观察CSE对成纤维细胞Ⅰ型胶原合成的影响作用.方法 在光镜下观察染毒后细胞形态和结构的变化;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度的CSE在不同的时间对体外皮肤成纤维细胞存活力的影响,并绘制不同浓度下细胞的生长曲线;β-半乳糖苷酶染色方法检测CSE连续作用5代后成纤维细胞β-半乳糖苷酶的变化情况;流式细胞仪检测不同浓度的CSE作用下和不同染毒时间的细胞周期变化情况;RT-PCR检测不同浓度的CSE对成纤维细胞Ⅰ型前胶原mRNA表达的影响.结果 染毒后光镜下呈典型的损伤细胞形态;随着CSE染毒浓度的增大和时间的延长,细胞存活力明显下降;细胞生长曲线示各染毒组细胞生长速度较对照组明显减慢;染毒后细胞经5次传代后β-半乳糖苷酶染色呈明显的阳性,对照组染色为阴性;细胞周期动力学显示,随着作用浓度的增加和作用时间的延长,G1、G2期细胞数增加,S期细胞数减少;CSE作用后,成纤维细胞的Ⅰ型前胶原mRNA表达降低.结论 CSE对体外成纤维细胞具有明显的损伤作用,对细胞的增殖和生长有一定的抑制作用;低浓度CSE长期作用的积累,使多次传代的成纤维细胞具有衰老细胞的特点;CSE能够抑制细胞活性,引起细胞DNA复制和有丝分裂障碍,对各期有不同程度的阻滞.CSE对成纤维细胞的胶原合成有一定抑制作用.