鸢尾素通过激活自噬促进老龄小鼠BMSCs骨向分化的体外研究

摘要

目的:探究鸢尾素对老龄小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响及其作用机制.方法:分离老龄小鼠BMSCs,并进行成骨诱导培养,检测不同浓度的鸢尾素对BMSCs碱性磷酸酶(ALP)活性的影响,筛选出鸢尾素的干预浓度;将成骨诱导后的老龄小鼠BMSCs分为对照组(Vehicle)、鸢尾素组(Irisin)和自噬抑制组(Irisin+3-MA),采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组细胞成骨相关基因Runx2、Osx、ALP、COL-I、OPG、OPN和OCN的转录表达,western blot检测各组细胞自噬相关蛋白P62和LC3B的表达,ALP染色法观察各组细胞ALP的表达情况.结果:鸢尾素可呈浓度依赖性地增强BMSCs的ALP活性且具有饱和性,故选择100ng/mL作为干预浓度;鸢尾素能显著降低P62的表达,同时明显促进LC3BII的表达(P＜0.05);显著上调Runx2、Osx、ALP和COL-I的转录表达(P＜0.05),并促进ALP的表达.而且,当采用3-MA抑制BMSCs的自噬活性后,鸢尾素激活自噬、促进BMSCs成骨相关基因转录表达(P＜0.05)和促进ALP表达的作用明显减弱.结论:鸢尾素可通过激活自噬促进老龄小鼠BMSCs骨向分化.