三基因缺失重组弱毒株(PRV-HNX-TK-/gE-/gG-+PCV2ORF2)不同途径免疫的效果分析

摘要

为评价口服免疫猪伪狂犬病毒三基因缺失重组弱毒株PRV-HNX-TK^-/gE^-/gG^-+PCV2 ORF2对母源抗体阳性保育猪的保护效果,本研究将该重组弱毒株通过口服和颈部肌肉注射两种不同途径免疫母源抗体阳性的断奶仔猪,通过ELISA方法测定血清PRV gB抗体、PCV2 Cap抗体和IFN-γ水平,利用固定病毒-稀释血清的中和试验方法检测PRV中和抗体水平;免疫结束后攻毒,记录各组猪临床表现和病理变化、测定其鼻拭子和肛拭子中病毒排毒时间、病毒载量等指标。结果显示,整个免疫试验过程中,口服组与注射组猪的PRV gB抗体均维持阳性、血清中PRV中和抗体效价均高于1:4、IFN-γ含量在免疫后均能达到300 pg/mL以上,PCV2抗体阳性率则出现下降;而未免疫组猪在第7 d后gB抗体转阴,中和抗体效价低于1:4、IFN-γ含量维持在约250 pg/mL,PCV2抗体阳性率(母源抗体)持续到二免后28 d才开始下降。免疫后攻毒,检测结果显示,口服组与注射组比对照组猪提前2 d体温下降,提前7 d恢复采食,而对照组猪出现高温、打喷嚏、咳嗽、流鼻涕、食欲不振、精神沉郁和神经症状并持续至攻毒后第8 d,并于攻毒后第12 d开始采食;口服组与注射组猪排毒高峰在攻毒后第2 d^6 d,第12 d后均停止排毒,对照组猪排毒持续期大于14 d;脑组织病理切片观察可见,口服组与注射组猪脑组织中仅少量小胶质细胞和淋巴细胞增多,而对照组猪脑组织中出现胶质细胞结节、血管袖套现象、卫星现象、噬神经元现象等病理变化,对照组猪扁桃体隐窝腔内含有大量脱落的隐窝上皮细胞、白细胞和炎性渗出液,并有燕麦细胞增多。以上结果表明口服方式免疫该三基因缺失重组弱毒株能够使保育猪产生针对PRV的有效免疫应答,但并不能诱导高水平的PCV2抗体。本研究为PRV疫苗研发带来了新的方向,也为免疫途径提供了更多选择,同时首次证实了该缺失弱毒株口服和肌注均能提供相似的免疫保护效果。