鸡传染性支气管炎病毒LH2/01/10的分离鉴定

摘要

2001年在我国黑龙江省某鸡场疑似鸡传染性支气管炎的发病鸡群中,分离到一株病毒,将该病毒接种10日龄SPF鸡胚,取72 h的尿囊液进行电镜观察并用1 %胰酶处理,结果发现尿囊液中存在典型的冠状病毒,用胰酶处理过的尿囊液能凝集SPF鸡的红细胞,初步鉴定为鸡的传染性支气管炎病毒.将该病毒尿囊液再次接种10日龄SPF鸡胚,通过病毒对鸡胚的致病作用、病毒超微形态特征以及病毒凝集鸡红细胞的特性等对该毒株进行研究,结果表明:经胰酶处理后的病毒尿囊液可凝集鸡红细胞.鸡胚的第二代病毒尿囊液(命名为LH2/01/10)分别接种1日龄和15日龄的SPF鸡,发现对不同日龄的鸡表现不同的致病性,对1日龄接种鸡和同笼饲养的同居对照鸡致病力高,发病率为11/11,致死率分别为4/6和2/5;15日龄接种和同居感染鸡发病率为9/9,致死率分别为1/5和1/4.实验应用反转录-聚合酶链式反应技术对LH2/01/10的膜蛋白基因进行扩增、克隆和序列测定,结果表明该基因具有IBV M基因的共有分子特征,与IBV标准株M41的M基因核苷酸的同源性为90 %,氨基酸的同源性为91 %.这从分子水平进一步证实引起鸡群死亡的病毒为鸡传染性支气管炎病毒.