传染性法氏囊病病毒结构蛋白VP3基因的克隆与原核表达

摘要

利用PCR技术扩增出IBDV的结构蛋白VP3基因,将其克隆到表达载体pPROEX HTa中,获得重组质粒命名为VP3/PA,经PCR、酶切和序列分析鉴定表明,插入的位置、大小和读码框均正确.SDS-PAGE检测表明,经重组质粒VP3/PA转化、诱导的受体菌E.coli DH5 α能表达结构蛋白VP3基因,约33 Ku,表达量达到了菌体总蛋白的33.9%,经Western blot等检测表明,诱导表达的抗原蛋白能与vvIBDV阳性血清发生特异性反应.这为IBDV血清学诊断方法的建立打下了基础.