一步法多重RT-PCR检测猪圆环病毒2型和猪繁殖与呼吸道综合征病毒

摘要

根据猪圆环病毒2型(PCV2)的ORF2和猪繁殖与呼吸道综合征病毒(PRRSV)的ORF7相对保守区序列分别设计了两对引物PH1/PH2和PT1/PT2,将PCV2和PRRSV细胞毒按1:1混合,设为模拟样品,采用病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒同时提取PCV2 DNA和PRRSV RNA核酸,利用2对引物进行一步法多重RT-PCR.结果同时得到与实验设计相符的560 bp(PCV2)和398 bp(PRRSV)特异性扩增条带,而对其他5种猪病原的扩增均为阴性.敏感性试验表明,建立的一步法多重RT-PCR方法可检测出10 ng PCV2 DNA和5 ng PRRSV RNA.