Asia 1型口蹄疫病毒VP1基因的表达鉴定及其多抗制备

摘要

本研究旨在表达口蹄疫病毒(FMDV)的VP1全基因并制备特异性的多克隆抗体.利用PCR方法扩增Asia 1 IND 49197株VP1全基因,将其克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,在大肠杆菌BL21中进行表达.SDS-PAGE结果显示表达产物分子量约为31.6 ku,以包涵体的形式存在.通过Ni-NTA Purification System纯化后进行western blot和间接ELISA分析,结果显示重组蛋白能够被FMD阳性血清识别,具有良好的反应性.将纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,ELISA测定抗体效价为1:20480,病毒中和试验测定抗体效价为1:64.本研究所表达的VP1蛋白可用于开发检测Asia 1口蹄疫抗体的诊断试剂,所制备的多克隆抗体为进一步研究VP1的结构、功能以及抗原表位的鉴定提供了条件.