牛疱疹病毒1型复制非必需基因UL0.5的鉴定

摘要

牛疱疹病毒1型(BHV-1)和5型(BHY-5)为同源性最高的两种α疱疹病毒亚科成员,分别引起牛的呼吸道和神经症状.序列比较显示,BHV-1基因组中具有一个独特的UL0.5基因.为研究该基因的功能,本研究构建BHV-1 UL0.5基因缺失转移质粒,与野生型基因组共转染MDBK细胞,通过空斑纯化获得UL0.5基因缺失突变株(rBHV-1 △UL0.5);PCR和westem blot鉴定结果表明,重组病毒形成的空斑大小及一步法生长曲线与野生型基本相同;家兔接种试验表明,突变株与野生型在急性感染期、潜伏感染期及再激活期病毒排毒量无明显变化;Real time PCR检测3个时期三叉神经节中病毒基因组的拷贝数也无明显差别.综上所述,UL0.5基因是BHV-1的复制非必需基因,该基因缺失后对家兔致病性无显著影响.