犬细小病毒VP2基因编码主要抗原表位区的核酸免疫及其免疫原性研究

摘要

为评价犬细小病毒(CPV)VP2主要抗原表位的免疫原性,本研究对CPV YZ株VP2的氨基酸序列进行分析,确定了主要抗原表位区域(VP2-228),通过PCR扩增相应的表位编码区域基因片段(700 bp),将其克隆于真核表达载体pVAX1中构建重组真核表达质粒pVAX1-VP2-228.Western blot结果显示VP2-228能够在COS-7细胞中正确表达.将该重组质粒免疫小鼠,利用血凝抑制试验检测不同时期的抗体水平,以MTT法检测免疫35 d时淋巴细胞的增殖活性.结果表明pVAX1-VP2-228能够诱导小鼠产生较高的抗体水平;淋巴细胞增殖试验表明免疫小鼠的淋巴细胞刺激指数显著高于对照组(p＜0.05).本研究为开展CPV DNA疫苗的研究提供了实验依据.