新疆牛源溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性和毒力分析

摘要

为鉴定新疆石河子地区某规模化牛场表现呼吸道感染症状荷斯坦病牛的细菌性病原及其分离株的血清型、耐药基因和毒力基因携带情况,本研究无菌采集病死牛病变组织,采用常规细菌分离培养及PCR方法鉴定细菌,采用PCR方法检测其血清型、耐药基因和毒力基因携带情况,采用K-B纸片法检测其耐药表型。结果显示,从病变组织样品中分离了4株荚膜A1型的溶血性曼氏杆菌(Mh-1、Mh-2、Mh-3、Mh-4);耐药表型显示4株Mh对β-内酰胺类(青霉素)、氨基糖苷类(链霉素)和糖肽类(替考拉宁)药物耐药;耐药基因仅检测到β-内酰胺类基因blaTEM;分离菌株Mh-1携带8类9种毒力基因中的5种(LKT-C、gs60、fbpA、gapA、ptfA),Mh-2携带其中的4种(LKT-C、plpB、dnaN、ptfA),Mh-3携带其中的7种(LKT-C、plpB、gs60、fbpA、gapA、dnaN、ptfA),Mh-4携带其中的6种(LKT-C、plpB、gs60、fbpA、gapA、ptfA)。同时分离出1株荚膜A型,脂多糖L3型的多杀性巴氏杆菌(Pm-1);Pm-1仅对克林霉素耐药;Pm-1携带6类12种不同的毒力基因(exbD、tonB、hsf2、ptfA、oma87、ompA、ompH、plpB、psl、nanB、tbpA、pmHAS)。将Mh和Pm-1均以3.2×10^(8) cfu/mL的剂量感染30只小鼠进行致病性试验,结果显示,4株Mh感染小鼠于3 d内陆续全部死亡,Pm-1感染小鼠于10 h内全部死亡,表明分离菌株Mh和Pm-1均携带致病性毒力基因,且具有较强的致病性。结果表明,新疆石河子地区某集约化牛场表现为呼吸道症状病死牛的细菌性病原是牛源Mh和Pm混合感染,两者均携带与呼吸道粘附侵染相关的IV型菌毛基因ptfA,且Pm-1株主要对青、链霉素耐药,对大多数药物较敏感,为本地区牛呼吸道疾病综合征的流行病学调查与临床治疗提供参考依据。