应用杆状病毒表达系统在Sf9昆虫细胞中重组表达Legumain蛋白

摘要

目的通过昆虫一杆状病毒表达系统表达获得Legumain蛋白,为进一步研究其在葡萄膜黑色素瘤中的作用建立基础。方法实验研究。对2011年4月至2012年1月在陕西省眼科中心应用克隆Legumain蛋白基因,并将其基因片段插入pFastBac载体获得重组载体,转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞后得到重组Bacmid,转染昆虫Sf9细胞,Western.Blotting印迹和SDS-PAGE检测重组蛋白的表达。结果获得了Legumain蛋白的重组杆状病毒;Western Blotting印迹和SDS-PAGE分析表明,该重组杆状病毒感染昆虫Sf9细胞后表达Legumain蛋白,与预期结果一致。结论通过昆虫一杆状病毒表达系统可成功获得Legumain蛋白,从而为进一步研究其在葡萄膜黑色素瘤侵袭与转移机制的作用奠定了工作基础。