银杏叶提取物对肾间质成纤维细胞中AGEs诱导的TGF—β1 CTGF表达及氧化应激的抑制作用

摘要

目的 探讨银杏叶提取物（EGb）在培养的正常大鼠肾间质成纤维细胞系（NRK-49F）中对糖基化终产物（AGEs）诱导的转化生长因子-β1（TGF—β1）和结缔组织生长因子（CTGF）mRNA表达及氧化应激作用的影响。方法于2005—01-2005—07以同济大学附属东方医院肾内科选用NRK-49F细胞为对象，以单纯培养基和高糖培养基（葡萄糖浓度25mmol／L）作为对照，用含AGEs的低糖（葡萄糖浓度5．5mmol／L）或高糖（葡萄糖浓度25mmol／L）DMEM培养液培养24h；并用不同质量浓度EGb（50，100mg·mL-1）预处理细胞以观察EGb的干预作用。采用流式细胞仪检测细胞内活性氧水平，逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测细胞TGF—β1和CTGFmRNA表达，结果与正常对照组相比，AGEs可显著增强NRK-49F细胞中TGF—β1和CTGFmRNA的表达和细胞内氧化水平，而与AGEs和高糖组分别相比，AGEs与高糖共同作用可使NRK-49F细胞中TGF-β1和CTGFmRNA的表达和细胞内氧化水平显著增加；银杏叶提取物预处理可抑制AGEs诱导的细胞内活性氧产生增加，同时阻断AGEs诱导的TGF-β1和CTGFmRNA表达上调。结论银杏叶提取物可能通过清除自由基，抑制氧化应激反应而拮抗肾间质成纤维细胞中AGEs诱导的TGF-β1和CTGFmRNA过表达，可能是EGb防治DN的作用机制之一.