卷曲螺旋结构域蛋白34对宫颈癌细胞生物学行为的影响研究

摘要

目的 探讨卷曲螺旋结构域蛋白34(CCDC34)在宫颈癌细胞中的表达及其对宫颈癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭力的影响.方法 收集南方医科大学第三附属医院妇产科2014-2016年间的16例宫颈鳞癌标本和16例慢性宫颈炎组织标本.荧光定量RT-PCR及Western Blot检测宫颈癌组织和细胞中CCDC34的表达;通过构建CCDC34慢病毒载体干扰CCDC34的表达,荧光定量RT-PCR和Western blot验证CCDC34的干扰效果.使用噻唑蓝(MTT)法、BrdU掺入实验、Transwell小室侵袭实验、流式细胞术来检测干扰CCDC34对Hela细胞增殖、迁移、侵袭能力及凋亡的影响.应用Caspase-3活性检测试剂盒及Western blot检测沉默CCDC34后Caspase-3的活性变化及在蛋白水平的表达.结果 CCDC34在宫颈癌细胞及组织中高表达;MTT及BrdU掺入实验显示,CCDC34干扰组的细胞增殖能力较对照组显著降低(P＜0.05);Transwell迁移与侵袭实验显示,CCDC34干扰组穿膜细胞数与对照组相比显著减少[(57±7.9)个/200倍视野vs.(98±9.2)个/200倍视野,P＜0.05;(33±5.2)个/200倍视野vs.(70±5.7)个/200倍视野,P＜0.05],细胞凋亡显著增加[(27.60±5.30)％vs.(9.45±1.90)％]及Caspase-3的活性明显增强.结论 沉默CCDC34的表达可显著抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡.