hEGF转基因表皮细胞的制备及其EGF蛋白表达

摘要

目的 应用Ｇ４１８筛选转染ＥＧＦ基因后的转基因上皮细胞，并测定外源性基因在转基因细胞中的稳定表达。方法 选用构建的ｐＢＫ－Ｓｉｇｎａｌ－ＥＧＦ质粒，在脂质体ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ的介导下，转染培养６０％～７０％连片的人表皮细胞，然后利用Ｇ４１８进行筛选出稳定表达的细胞克隆。大量培养传代后，通过ＥＬＩＳＡ试剂盒检测细胞培养上清中表皮细胞生长因子（ＥＧＦ）外源性基因稳定表达水平。结果 ①人表皮细胞