脉冲电磁场对免疫磁性分选人前软骨干细胞增殖功能的影响

摘要

目的研究脉冲电磁场对免疫磁性分选人前软骨干细胞（PSCs）增殖功能的影响。方法采用酶消化法从流产胎儿下肢股骨干骺端中收集细胞,选用免疫磁性分选技术分离出PSCs;经体外扩增培养后采用流式细胞术、免疫组化、免疫荧光、RT-PCR等技术鉴定纯化后的PSCs。采用50 Hz 1 mT脉冲电磁场间断刺激纯化后的PSCs,并绘制细胞生长曲线,采用MTT法测定细胞增殖活性,采用流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡情况。结果从流产胎儿干骺端中成功培养出细胞表面表达成纤维生长因子受体-3（FGFR-3）标记物的人PSCs;免疫磁性分选系统能有效分离纯化PSCs;PSCs经脉冲电磁场刺激4 d和6 d后,发现能明显促进细胞增殖功能（P＜0.05）,其S期细胞数量百分比较对照组显著增高（P＜0.01）,细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率均较对照组明显降低（P＜0.05）。结论免疫磁性分选系统能有效分离、纯化PSCs,脉冲电磁场刺激能显著提高体外培养人PSCs增殖功能并抑制细胞凋亡。