Cangrelor通过抑制GPR17介导的炎症缓解博来霉素诱导的小鼠肺纤维化

摘要

目的探讨抗血小板药Cangrelor缓解博来霉素诱导的小鼠肺纤维化的作用及机制。方法整体动物实验以博来霉素(BLM)3 mg·kg-1诱导C57BL/6J小鼠发生肺纤维化,Cangrelor在给予BLM前2天至给药第14天期间给予,皮下注射,每天1次。BLM给药第14天,取肺固定后石蜡切片做HE染色、Msasson′s染色和GPR17、巨噬细胞特异性免疫组化染色并做纤维化评分,Western蛋白质印迹法检测肺组织GPR17蛋白表达,定量PCR检测胶原蛋白mRNA表达、定量PCR和ELISA检测肺组织炎症因子的合成与释放。细胞实验采用RAW 264.7细胞,以博来霉素,Cangrelor和GPR17siRNA处理12 h;细胞活性以MTT法检测,以定量PCR和ELISA分别检测细胞炎症因子的合成和释放。结果 (1)BLM诱导小鼠发生肺纤维化的同时,肺组织GPR17表达和GPR17阳性巨噬细胞增加,合成和释放TNF-α,IL-6和TGF-β1增高,肺组织合成胶原Ⅰ和Ⅲ增高;Cangrelor 2.5, 5.0和10.0 mg·kg-1不仅剂量依赖性减弱BLM诱导的炎症反应和致纤维化作用,且明显减少GPR17阳性巨噬细胞的数量;(2)BLM(1 mg·L^(-1))诱导RAW 264.7巨噬细胞发生炎症的同时可促进细胞表达GPR17,抑制GPR17表达可减轻细胞炎症,Cangrelor 2.5~10.0μmol·L^(-1)浓度依赖性减轻BLM诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症。结论 Cangrelor通过抑制GPR17介导的炎症而减轻BLM诱导的小鼠肺纤维化。