连翘花黄色素对秀丽隐杆线虫应激抗性的影响

摘要

目的研究连翘花黄色素(FFYP)对线虫氧化应激抗性的影响,并初步探究其作用机制。方法通过化学方法检测FFYP的体外抗氧化活性;采用细胞内抗氧化活性(CAA)方法检测FFYP细胞内抗氧化活性;以秀丽隐杆线虫(C.elegans)为模型,检测FFYP对线虫氧化应激抵抗力及体内抗氧化指标的影响;采用Daf-16和Skn-1突变体线虫和qRT-PCR实验探究其作用机制。结果FFYP具有1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力,铁离子还原能力和活性氧自由基(ROS)清除能力,并且具有浓度依赖性。FFYP对线虫氧化应激抵抗力的影响实验结果表明,20,40和80μg·mL^-1的FFYP均能提高线虫氧化应激抵抗力,其中40μg·mL^-1效果最明显。线虫体内ROS含量和抗氧化系统活性检测结果显示:FFYP能够显著降低线虫体内ROS含量,并提高超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,增加还原型谷胱甘肽(GSH)含量,表明FFYP增强线虫对氧化应激抗性是通过提高线虫体内抗氧化防御系统活性而得到。使用突变体线虫和qRT-PCR实验初步探索FFYP提高线虫氧化应激抵抗力的机制,结果显示,FFYP无法延长Skn-1突变体线虫在氧化应激下的寿命,但是Daf-16和Hsf-1突变体线虫寿命可被延长。qRT-PCR实验也显示,FFYP作用后,Daf-16,Skn-1和Hsf-1靶基因的表达量均被提高。表明FFYP通过Daf-16,Skn-1和Hsf-1的共同作用来提高线虫对氧化应激的抵抗力。结论FFYP具有很好的抗氧化及抗应激药用价值,有潜力成为一种新的有生物活性的天然色素。