牛蒡子苷对三阴性乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖和凋亡的影响及作用机制

摘要

目的 探究牛蒡子苷(ARC)对三阴性乳腺癌MDA-MB-453细胞的抑制作用及其作用机制.方法 ARC处理MDA-MB-453细胞后,采用CCK8法检测细胞存活,平板克隆实验观察单个细胞克隆形成率,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率,荧光染色观察细胞内胱天蛋白酶3活性,Western印迹法检测细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)、细胞周期蛋白D1、P27、CDK2和细胞周期蛋白E1的表达.结果 与细胞对照组相比,药物处理24,48和72 h后,ARC 100,200,300,400和500μmol·L-1组MDA-MB-453细胞存活率显著降低(P<0.01);药物干预48 h后,ARC 50,100和200μmol·L-1组MDA-MB-453细胞克隆形成率显著降低(P<0.01),ARC 100,200,300,400和500μmol·L-1组G0/G1期细胞百分比显著增加(P<0.01),S期细胞百分比明显减少(P<0.01),细胞内胱天蛋白酶3活性和早期凋亡率无显著性变化.Western印迹法结果显示,MDA-MB-453细胞经ARC 100,300和500μmol·L-1干预48 h后,CDK4和细胞周期蛋白D1表达升高(P<0.05),P27蛋白表达降低(P<0.05),CDK2和细胞周期蛋白E1表达无显著性变化.结论 ARC对三阴性乳腺癌MDA-MB-453细胞体外增殖能力具有抑制作用,可引起MDA-MB-453细胞G0/G1期阻滞,其机制可能与降低CDK4和细胞周期蛋白D1表达及升高P27表达有关.