江浙蝮蛇毒镇痛组分的分离纯化及其理化性质

摘要

目的分离筛选江浙蝮蛇毒中主要镇痛组分,研究其分子量、等电点、纯度、氨基酸序列、稳定性等理化性质,以及镇痛作用、机体耐受性和依赖性等药理学性质.方法采用离子交换和分子筛,以柱层析法分离蛇毒组分.用生化测定方法,测定其理化性质.用热板法和醋酸扭体法等确定最佳镇痛组分,并用纳洛酮催促和自然戒断实验、耐受性实验考察其依赖性和耐受性.结果分离获得14个蛋白组分,经ED50/LD50筛选出最佳镇痛组分C4,鉴定结果表明纯度为电泳纯,HPLC相对纯度为92.16%,分子量16.6 ku,等电点8.8,氨基酸序列与磷脂酶A2同源,为一种新的镇痛蛋白,并获得其紫外吸收特征峰、镇痛耐受和依赖性等性质.结论 C4组分具有显著的镇痛效果,未发现耐受性和依赖性,值得进一步研究开发.