2-乙酰氨基芴诱导γH2AX焦点的形成

摘要

目的探讨DNA损伤剂2-乙酰氨基芴(2-AAF)是否可诱导γH2AX焦点的形成及γH2AX作为检测DNA损伤的一个新的特异指标的可能性.方法用2-AAF处理中国仓鼠CHL细胞,应用免疫荧光方法检测γH2AX焦点的形成,并通过中性彗星实验验证DNA损伤的程度.结果 0.1,1,5和20 mg·L-1的2-AAF 都可使细胞核内γH2AX 焦点数量及有γH2AX焦点生成的细胞数量增加,但只有20 mg·L-1 2-AAF处理的细胞才出现明显的彗尾增长及有彗尾的细胞数量增加.另外,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)家族抑制物渥曼青霉素可抑制2-AAF诱导的γH2AX焦点形成.结论 2-AAF可通过激活 PI3K家族成员使H2AX磷酸化,进而诱导γH2AX焦点的形成.γH2AX检测DNA损伤的敏感性优于彗星实验,因此,γH2AX有可能成为衡量DNA损伤程度的良好指标.