重组人红细胞生成素对骨髓间充质干细胞红细胞生成素受体的上调作用

摘要

目的 研究重组人红细胞生成素(rhEpo)处理骨髓间充质干细胞(MSCs)后对Epo受体(EpoR)的影响.方法 含rhEpo 0, 5及10 Ku·L-1的培养基培养MSCs 24, 48及72 h后,MTT法检测细胞增殖;6 d后,免疫荧光染色检测EpoR阳性的细胞百分率.rhEpo预处理24 h, 再缺氧处理48 h,Hoechst染色,通过形态变化检测细胞凋亡率;rhEpo预处理6 d,再缺氧处理48 h,Western蛋白印迹法检测EpoR,磷酸化Janus激酶2 (p-Jak2),磷酸化转导及转录活化蛋白(p-Stat5)及缺氧诱导因子-1a(Hif-1a)蛋白表达.结果 MTT结果显示,rhEpo处理的MSCs增殖能力增强;免疫荧光结果显示,随rhEpo浓度的增加,EpoR阳性细胞数增加;对照组,rhEpo 5及10 kU*L-1组EpoR阳性细胞百分率分别为(8.3±4.2)%, (24.7±8.1)%和(30.8±10.5)%.rhEpo预处理能增强MSCs抗缺氧凋亡的能力,缺氧处理后, 对照组、rhEpo 5及10 kU·L-1组细胞核固缩率分别为(42.2±8.7)%, (21.9±8.0)%和(20.1±7.9)%.Western蛋白印迹结果显示,rhEpo预处理及预处理后行低氧培养的MSCs,随rhEpo浓度的增加,EpoR及下游抗细胞凋亡蛋白p-Jak2,p-Stat5和Hif-1a蛋白表达增加.结论 rhEpo可以促进MSC EpoR的表达,并增加EpoR下游抗细胞凋亡蛋白的表达.