HPLC法测定大鼠血浆中咪达唑仑的含量及其在药物相互作用研究中的应用

摘要

目的:建立高效液相色谱法测定大鼠血浆中咪达唑仑含量,并应用于佐米曲坦对大鼠肝细胞中CYP3A的诱导作用的研究.方法:采用色谱柱为DiamonsilTM(钻石)C18(200 mm ×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.01 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.0)(58∶42),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为220 nm.咪达唑仑(10 mg·kg-1)作为经典CYP3A探针底物对3组不同诱导后的大鼠(佐米曲坦样品组、地塞米松阳性对照组或空白对照组)静注给药,测定咪达唑仑的清除率等参数来研究CYP3A活性的变化.结果:咪达唑仑在0.3～375 μmol·L-1浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9997,n=5),检测限为0.0018 μmol·L-1,平均回收率为97.9%.经佐米曲坦诱导的雄性大鼠组中咪达唑仑AUC0-t和T1/2与雄性空白大鼠组中咪达唑仑AUC0-t和T1/2比,显著降低,清除率增加,与地塞米松组中咪达唑仑的动力学参数相近;而经佐米曲坦诱导的雌性大鼠的动力学参数与空白雌性组比没有明显的变化.结论:本文建立的大鼠血浆中咪达唑仑测定方法稳定、准确、简便,能使咪达唑仑作为探针药物很好地运用于佐米曲坦对大鼠肝中CYP3A诱导作用研究中.另外佐米曲坦对大鼠肝中CYP3A具有性别差异的诱导作用.