PKC-NF-κB信号传导对子(癎)前期患者脐血清诱导脐动脉平滑肌细胞胶原mRNA表达影响的体外研究

摘要

目的探讨蛋白激酶C-核因子-kappa B(protein kinase C-nuclear factor-kappa B,PKC-NF-κB)信号传导通路对子(癎)前期患者脐静脉血清诱导脐动脉平滑肌细胞(human umbilical artery smooth muscle cell,HUASMC)增殖及前胶原Ⅰ、ⅢmRNA的表达的影响.方法采用组织块培养法培养正常妊娠HUASMC,传代,待细胞长满至70%～80%,加或不加PKC的抑制剂多黏菌素B(ploymyxin B,PMB)作用30 min后分别加入子(癎)前期患者脐静脉血清,培养2 h,Western印迹法测定细胞胞浆Ⅰ-κB、胞核NF-κB活性;细胞培养48 h,MTT测定细胞活力,流式细胞学测定细胞周期,逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chin reaction,RT-PCR)测定HUASMC的bcl-3及前胶原Ⅰ、ⅢmRNA的表达.结果子(癎)前期患者血清组HUSMC的胞浆Ⅰ-κB含量(0.3765±0.0321)明显低于对照组(0.7857±0.0296),胞核NF-κB含量(0.8549±0.0395)、bcl-3表达(0.6782±0.213)、细胞活力(0.249±0.0748)、前胶原Ⅰ的表达(0.7387±0.208)、S期细胞百分比(20.13±1.21)%及G2/M期细胞百分比(16.45±0.89)%明显高于对照组(P＜0.01),G0+G1期细胞百分比(62.53±2.85)%明显低于对照组(P＜0.01).PMB预处理组Ⅰ-κB含量(0.8120±0.0352)明显高于子(癎)前期组(P＜0.01);NF-κB核转位(0.4528±0.0315)、bcl-3表达(0.216±0.193)、S期细胞百分比(8.21±0.56)%及G2/M期细胞百分比(5.38±0.52)%、细胞活力(0.1525±0.0454)及前胶原Ⅰ(0.3084±0.022)的表达低于子(癎)前期组(P＜0.01),G0+G1期细胞百分比(89.61±3.18)%明显高于子(癎)前期组(P＜0.01).结论PKC-NF-κB信号传导途径的激活在子(癎)前期患者胎盘血管病变过程中可能起重要作用.