甲状腺功能低下对新生期大鼠海马神经元凋亡及Bcl-2、Bax基因表达的影响

摘要

目的探讨甲状腺功能低下(简称甲低)对新生期大鼠海马神经元凋亡及Bcl-2、Bax基因表达的影响.方法孕15天SD大鼠丙基硫氧嘧啶(50 mg/d)灌胃造成仔鼠甲低动物模型.采用化学发光法测定1、5、10、15日龄仔鼠血清FT3及FT4水平.取各日龄海马组织, 应用光镜和透射电镜观察神经元形态学特点,琼脂糖凝胶电泳检测DNA降解片段,Western Blotting 检测Bcl-2和Bax基因蛋白表达的变化.结果模型仔鼠各日龄血清FT4水平始终接近于药盒检测限(2.8 nmol/L),显著低于对照仔鼠(1、5日龄 P均<0.01; 10、15日龄 P均<0.001);血清FT3较同日龄对照仔鼠降低(1日龄 P<0.05; 其他日龄P均<0.01).模型仔鼠海马组织光镜下变性神经元增多,透射电镜下神经元凋亡明显增加,以10、15日龄为著.DNA片段分析显示模型仔鼠各日龄均出现不同程度的DNA降解片段,对照仔鼠仅在10日龄可见少量DNA降解片段.Western Blotting结果显示对照仔鼠Bcl-2蛋白各日龄间表达水平不同(P<0.05),1、5日龄表达较高,10日龄有所下降,15日龄回升;各日龄模型仔鼠与对照组相比表达水平明显下降(1日龄 1.95±0.27比2.59±0.19,P<0.05; 5日龄 1.86±0.24比2.47±0.17,P<0.05; 10日龄 1.29±0.22比1.86±0.28,P<0.05; 15日龄 1.21±0.27比2.18±0.17,P<0.01),其10日龄内变化趋势和对照组相似,但在15日龄仍持续降低.模型仔鼠Bax蛋白各日龄与对照仔鼠相比表达水平明显增加(1日龄 1.69±0.14比1.24±0.23,P<0.05; 5日龄 1.78±0.16比1.29±0.17,P<0.05; 10日龄 1.92±0.18比1.45±0.14,P<0.05; 15日龄 1.86±0.14比1.51±0.12,P<0.05),而两组各日龄间变化差异无统计学意义(P均>0.05).Bcl-2/Bax比值各日龄模型仔鼠与对照仔鼠相比明显下降(1日龄 1.16±0.17比2.12±0.35,P<0.05; 5日龄1.05±0.16比1.94±0.36,P<0.05; 10日龄 0.68±0.17比1.29±0.16,P<0.05; 15日龄 0.67±0.19比1.45±0.22,P<0.01).结论甲状腺功能低下可致新生期大鼠海马神经元凋亡,其机制可能与海马神经元Bcl-2蛋白下调、Bax上调及Bcl-2/Bax比值下降有关.