激活Gs蛋白对胆红素诱导的大鼠小脑颗粒神经元凋亡影响的研究

摘要

目的 研究激活Gs蛋白对胆红素诱导的小脑颗粒神经元凋亡的影响及作用机制。方法 采用原代培养的新生大鼠小脑颗粒神经元 ,用霍乱毒素 （CT）激活Gs蛋白 ,用二乙酸荧光素（FDA）染色及四甲基偶氮唑蓝 （MTT）法测定胆红素诱导的小脑神经元存活率 ,12 5I放射免疫法测定细胞内环磷酸腺苷 （cAMP） ,Fura 2 /AM荧光比值成像技术测定细胞内钙浓度 （[Ca2 +]i）。结果 CT诱导细胞内cAMP升高并呈剂量依赖性地保护胆红素诱导的小脑颗粒神经元凋亡。当加入腺苷环化酶（AC）刺激剂 （Forskolin）及cAMP类似物 （8 溴 环磷酸腺苷 ）后 ,虽导致细胞内cAMP升高 ,但不能阻断或减弱胆红素诱导的神经元凋亡。另发现胆红素浓度依赖性触发细胞内钙升高 ,而CT可降低胆红素导致的细胞内钙的升高。结论 Gs蛋白可能参与了小脑颗粒神经元凋亡的调控 ,激活Gs蛋白拮抗胆红素诱导的神经元凋亡的机制是通过降低细胞内钙而不依赖于cAMP的途径