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人肾母细胞瘤裸小鼠肾原位移植模型的建立和生物学特性的研究

摘要

目的建立人肾母细胞瘤的裸小鼠肾原位移植模型.方法直接将未经处理的患儿肾母细胞瘤组织块接种在裸小鼠肾包膜下作原代以及系列传代移植;原、2、3、4代接种裸小鼠数目分别为2、5、5、18只,每代间隔时间均为8周.原、2、3代裸小鼠分别于接种8周后全部处死,4代裸小鼠从接种后3周至8周,每周处死3只至全部,取出移植瘤进行称重,以反映肿瘤生长动力学.采用流式细胞仪检测原代和系列传代肿瘤样本中细胞周期/凋亡分布以及倍体数.光学显微镜下观察肿瘤标本形态学以及角质蛋白18和结蛋白的免疫组化染色特征,聚合酶链反应扩增基因组微卫星序列D14S68、D18S69 and D20S199,以确定其人源性.结果人肾母细胞瘤在原代裸小鼠中形成肾原位移植瘤,随后系列传四代,共30只裸小鼠,其中27只在肾原位可以检测到移植瘤生长;移植瘤生长曲线符合指数模型,其倍体数、细胞周期分布在各代之间相似.所有移植瘤都保留了最初的组织形态学和免疫组化染色特征.而且,移植瘤基因组微卫星DNA序列与人肾母细胞瘤完全一致.结论该异种原位移植瘤模型,准确地重现所移植的人肾母细胞瘤的形态和恶性生物学特点,具有重要的基础和临床研究应用价值.

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