肾缺血再灌注损伤与核仁应激的相关性研究

摘要

目的:研究核仁应激是否参与了肾缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI),并进一步探索核仁应激的分子机制,为临床防治肾IRI提供新的靶点.方法:将48只雄性昆明小鼠根据肾脏缺血时间不同随机平均分为4组:对照(control)组(0 min)及IRI 30 min组、45 min组和60 min组,采用微创手术夹同时夹闭双侧肾动脉的方法建立急性肾IRI模型.24 h后取眼球血测定血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和血清肌酐(serum creatinine,SCr)浓度;取双肾计算肾系数;并采用HE染色观察肾组织病理学改变;提取肾皮质组织总蛋白和RNA进行Western blot及RT-qPCR检测,待测指标包括p53蛋白、45S pre-rRNA、18S rRNA、Bax mRNA和Bcl2 mRNA.结果:与control组相比,IRI组BUN和SCr浓度上升(P0.80,P<0.01).与control组相比,IRI组皮质细胞内p53蛋白含量显著增加(P<0.05),Bax mRNA表达上调(P<0.01),同时45S pre-rRNA、18S rRNA和Bcl2 mRNA含量下降(P<0.01).结论:IRI造成的肾组织结构和功能损害可能与核仁应激密切相关.IRI可能通过阻碍rDNA转录导致核仁应激,从而激活下游p53诱导的细胞凋亡.