二甲双胍通过调节氧化应激、内质网应激和自噬减轻大鼠肾缺血再灌注损伤的作用研究

摘要

目的探讨二甲双胍能否减轻肾缺血再灌注损伤(I/R)后内质网(ER)应激、自噬作用和炎性反应。方法健康清洁级Wistar大鼠分为3组(n=6),即行假手术(Sham组)、双侧缺血1h再灌注2h(I/R组),缺血前腹腔注射二甲双胍0.125mg/(kg·d)14天(metformin组)。采用全自动生化分析仪测定血浆样品中肌酐(Cr)和乳酸脱氢酶(LDH)含量,通过紫外可见分光度计分别测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量;蛋白印迹分析GRP 78、CHOP、p-Eif2-α、Beclin-1、β-actin、XBP-1、ATF-6α、LAMP-2蛋白表达;RT-PCR检测IL-1β、IL-6和MCP-1表达;HE法进行组织学评估。结果二甲双胍可增强肾功能,减少细胞溶解(P<0.05)。与I/R组比较,显著提高了抗氧化酶(SOD、CAT、GPX)活性和GSH水平(P<0.05)。二甲双胍处理显著降低ER应激,这一作用通过下调GRP78、ATF-6、p-eIF-2α、XPB-1和CHOP得以证实。二甲双胍预处理的大鼠显示自噬参数(Beclin-1和LAMP-2)低表达,炎性因子(IL-1β、IL-6和MCP-1)减少(P<0.05)。结论二甲双胍对肾I/R具有保护作用,在I/R后减轻ER通路和自噬过程。