SIRT1/eNOS/NO通路在人参皂苷Rb1抗内皮细胞复制性衰老中的作用

摘要

目的:观察人参皂苷Rb1延缓人脐静脉内皮细胞(HUVECs)复制性衰老的作用,并探讨SIRT1/eNOS/NO通路在其中的作用机制.方法:建立原代HUVECs复制性衰老模型,根据细胞形态的变化、衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色阳性率和纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)的表达水平评估HUVECs衰老情况;采用real-time PCR方法和Western blot法检测沉默SIRT1前后衰老细胞中eNOS和PAI-1的mRNA和蛋白表达,并检测细胞上清NO的含量.结果:累积细胞群体倍增水平(CPDL)为16的HUVECs可作为复制性衰老模型;80μmol/L人参皂苷Rb1处理后衰老细胞内SIRT1和eNOS的mRNA及蛋白表达水平增加,NO含量增加(P<0.05),而PAI-1的mRNA和蛋白表达水平下降(P<0.05);沉默SIRT1后,衰老细胞内eNOS的mRNA及蛋白表达减少,PAI-1的mRNA及蛋白表达增加,NO含量减少(P<0.05);与SIRT1沉默组比较,在沉默SIRT1基础上加用人参皂苷Rb1后,eNOS和PAI-1表达水平及NO的含量未见明显变化.结论:人参皂苷Rb1可通过调控SIRT1/eNOS/NO通路延缓HUVECs复制性衰老.