运用蛋白质组学技术研究TNF-α对血管内皮细胞的作用机制

摘要

目的:研究TNF-α对培养血管内皮细胞蛋白质表达谱的影响,进一步探讨TNF-α对内皮细胞作用的分子机制,为寻找治疗心血管疾病的潜在靶标奠定基础.方法:用一氧化氮检测试剂盒检测人脐静脉内皮细胞(HUVECs)释放的一氧化氮的量;用二向电泳、图像分析、质谱鉴定等蛋白质组学技术测定TNF-α作用于血管内皮细胞后引起表达量有显著改变的蛋白质.结果:TNF-α可减少HUVECs释放一氧化氮的量.TNF-α作用HUVECs 6 h后有21个蛋白质表达量显著改变,其中11个蛋白质下调和9个蛋白质上调,并且有一个蛋白蛋只出现在TNF-α刺激的HUVECs中.结论:TNF-α抑制内皮细胞释放一氧化氮可能与其降低eNOS蛋白质表达和增加网钙结合素蛋白质表达有关;TNF-α增加MEKK-3的蛋白表达可能与其增加粘附分子的表达有关;运用蛋白质组学技术发现了内皮细胞中多个新的TNF-α的影响蛋白质,为寻找治疗心血管疾病的潜在靶标奠定了基础.