Akt/NF-κB信号途径参与免疫复合物诱导肾小球系膜细胞表达趋化因子

摘要

目的:探讨Akt/NF-κB信号途径在免疫复合物(ICs)诱导肾小球系膜细胞(MC)表达趋化因子中的作用.方法: 体外培养小鼠MC.对照组:0.5%(v/v)lipofectin作用8h后IgG单体刺激;刺激组:0.5%(v/v)lipofectin作用8h后AIgG(一种标准的ICs模型)刺激;反义、正义、错义寡核苷酸组: 0.5%(v/v)lipofectin转导Akt1反义、正义、错义寡核苷酸8h后AIgG刺激.ELISA法检测单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、巨噬细胞集落刺激因子(CSF-1)浓度, mRNA半定量用RT-PCR.EMSA法检测NF-κB活性.结果: MC有低水平NF-κB活化和组成性MCP-1、CSF-1 mRNA及蛋白表达.AIgG刺激后, NF-κB活化增强(0.35±0.06 vs 0.75±0.16, P＜0.01), MCP-1和CSF-1 mRNA表达上调(0.48±0.03 vs 0.72±0.02,P＜0.05;0.44±0.01 vs 0.59±0.02, P＜0.05),蛋白分泌增多(15.52±1.81 vs 43.05±3.18,P＜0.05; 389.06±13.75 vs 764.22±31.78,P＜0.05).Akt1反义寡核苷酸显著抑制AIgG诱导NF-κB活化(0.37±0.05 vs 0.75±0.16, P＜0.01)、MCP-1和CSF-1 mRNA(0.52±0.02 vs 0.72±0.02, P＜0.05; 0.44±0.01 vs 0.59±0.02, P＜0.05)及其蛋白(15.47±2.23 vs 43.05±3.18,P＜0.05;412.49±9.76 vs 764.22±31.78,P＜0.05)表达.正义、错义寡核苷酸无此作用.结论: Akt/NF-κB信号途径参与ICs诱导MC表达趋化因子MCP-1和CSF-1,提示此信号途径可作为抑制免疫复合物性肾小球肾炎炎症细胞浸润的一个新的治疗靶点.