大鼠巨噬细胞环加氧酶-2剪接异构体mRNA片段的分离和鉴定

摘要

目的:分离和鉴定大鼠巨噬细胞环加氧酶-2剪接异构体mRNA片段,并分析其可能意义.方法:采用RT-PCR和测序分析从大鼠巨噬细胞扩增、分离环加氧酶-2剪接异构体cDNA片段,并推导环加氧酶-2剪接异构体氨基酸序列,利用生物信息软件对氨基酸序列进行分析.结果:大鼠肺和血管平滑肌组织及腹腔巨噬细胞均发现COX-2目的条带(253bp),但腹腔巨噬细胞则出现了一条新的电泳带(422bp),经克隆和测序证实,该条带除目的条带的COX-2 DNA的第7、8外显子序列外,还包含第7、8外显子间的内含子序列,即保留的内含子(169bp).根据阅读框推测,在保留的内含子第21-23碱基出现终止密码.结论:首次发现大鼠腹腔巨噬细胞中存在COX-2基因的选择性剪接异构体(Genbank accession number:BU500100),其生物学意义有待进一步研究.