14-3-3σ负调控Akt抑制Rat1-Akt细胞成瘤性

摘要

目的:研究腺病毒介导14-3-3σ(Ad-14-3-3σ)对Akt过表达Rat1-Akt细胞成瘤性的作用,并探讨其作用是否通过负调控Akt而实现.方法:通过半体内和体内实验观察Ad-14-3-3σ转染对Rat1-Akt细胞在裸鼠中成瘤性的影响;采用Western blotting方法检测转染14-3-3σ基因后肿瘤组织内14-3-3σ蛋白及其对Akt蛋白、Akt磷酸化活性和Akt磷酸化底物水平的影响.结果:无论体外用Ad-14-3-3σ处理Rat1-Akt细胞,还是体内经瘤内注射Ad-14-3-3σ,均可见14-3-3σ可使荷瘤鼠肿瘤体积显著缩小(P＜0.05),出现肿瘤的时间推迟,其中以长时间不间断给药疗效最好;转染14-3-3σ基因治疗组的肿瘤组织中Akt蛋白、Akt-Thr308位点磷酸化活性及Akt磷酸化底物水平低于转染Ad-β-gal或PBS处理的对照组.结论:14-3-3σ可抑制Rat1-Akt细胞在裸鼠中的成瘤性,14-3-3σ通过负性调控Akt蛋白水平和磷酸化活性而抑瘤.