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【6h】

2-ME负性调控Akt1活性影响细胞周期和凋亡抑制鼻咽癌

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论文说明:缩略词索引

引 言

第1部分2ME抑制鼻咽癌细胞的体内外实验

第2部分2ME抑制鼻咽癌细胞分子机制的探讨

第3部分2ME影响高低分化鼻咽癌细胞的基因表达的研究

小 结

附图1

附图2

附图3

附图4

参考文献

致 谢

原创性声明

附录在读硕士期间所发表的论文

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摘要

本文主要针对2-ME负性调控Akt1活性影响细胞周期和凋亡抑制鼻咽癌进行了研究和探讨,文章主要内容结构如下:1.光镜形态学观察 2ME对于 CNE-l和 CNE-2细胞形态学的影响,可见细胞变圆脱壁,凋亡和坏死的细胞特征以及细胞增殖的减慢;2.MTT法定量评价2ME抑制 CNE-l和 CNE-2细胞活性的作用,并分析剂量一效应和时间一效应关系,结果显示用药的高低浓度分别有不同程度的抑瘤效应;3.软琼脂集落形成实验体外定量分析2ME抑制CNE-l和 CNE-2细胞增殖效应,结果显示微摩尔级的2ME对CNE-1和CNE-2细胞有不同程度的活性抑制作用,且抑制效应呈量效和时效关系。同时发现2ME对CNE-2的抑制作用大于CNE-1;4.裸鼠成瘤抑制实验研究体内ZME抑制CNE-2细胞增殖的作用,结果显示低剂量2ME抑制肿瘤细胞增殖,高剂量兼有抑制增殖和杀伤细胞的作用;5.流式细胞术检测2ME对CNE-l和 CNE-2细胞周期和凋亡的影响,结果显示2ME可使CNE-2细胞停滞在G2/M期。且抑制的效率随药物剂量的增大和作用时间的延长呈正相关;同时可见亚G1期(Sub-G1)细胞随2ME的用药量的增加以及作用时间的延长而增多;6.免疫印迹检测2ME对CNE-l和CNE-2细胞内Aktl磷酸化的影响,发现随着剂量的增加,Akt的磷酸化水平逐渐下降而总的Akt变化不明显;7.基因表达谱芯片分别检测2ME处理后的CNE-l和 CNE-2细胞基因表达谱的变化,发现两株细胞有相似的基因改变,其改变主要涉及细胞DNA损伤修复、细胞增殖、细胞凋亡以及细胞骨架相关基因等。

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